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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Corte. |
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Data corrente: |
09/02/2011 |
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Data da última atualização: |
09/02/2011 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
MELO, P. R.; ROSINHA, G. M. S.; FORNER, O.; ELISEI, C.; FRAGOSO, S.; SANTOS, L. R.; ARAUJO, F. R.; SOARES, C. O. |
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Afiliação: |
PATRÍCIA RODRIGUES DE MELO, UNIDERP; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; Universidade Federal do Paraná; BOLSISTA CNPGC; Fiocruz-Paraná; BOLSISTA CNPGC; FLABIO RIBEIRO ARAUJO, CNPGC; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC. |
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Título: |
Clonagem, purificação e avaliação da proteína PLDr de Corynebacterium pseudotuberculosis como marcador de infecção de ovinos e caprinos. |
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Ano de publicação: |
2010 |
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Fonte/Imprenta: |
In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza |
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Páginas: |
1 p. |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
A linfadenite caseosa é uma doença infectocontagiosa caracterizada pela formação de abscessos nos linfonodos e nas vísceras, sendo causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. Esta doença acomete, principalmente, caprinos e ovinos e, a alta virulência da bactéria deve-se principalmente à ação da exotoxina fosfolipase D (pld). Devido ao crescimento da caprinovinocultura no Brasil e da grande incidência da linfadenite nos rebanhos deste setor, o objetivo neste estudo foi avaliar o potencial de uso da PLDr, como marcador de infecção por C. pseudotuberculosis por meio de testes sorológicos. Foram feitas reações de PCR em um volume final de 50 ?L, contendo: 5 ?L de tampão, 1,5 ?L de MgCl, 2 ?L de primer gateway foward, 2 ?L de primer reverse; 1 ?L de dNTP; 37 ?L de água milliQ; 0,5 U/ ?L de Taq DNA polimerase; 1 ?L de DNA genômico de C. pseudotuberculosis. A clonagem foi feita utilizando o sistema de expressão gateway, por meio de reações de recombinação. As reações foram transformadas em células de Escherichia coli BL21 e DH5?. A expressão foi obtida por indução das células transformadas em meio LB, com o antibiótico ampicilina, e IPTG 1 mM. A produção da proteína foi verificada pela análise em eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, corado por coomassie blue. Por meio da análise em gel de agarose foi possível comprovar a amplificação pela PCR do gene pld com aproximadamente 924 pb e, a partir da eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, confirmou-se a produção da proteína PLDr, com peso molecular de aproximadamente 31 KDa. Espera-se, na conclusão deste estudo, obter a PLDr purificada e certificada por western blotting e, a padronização de um teste de ELISA indireto em soros de animais naturalmente infectados com C. pseudotuberculosis. MenosA linfadenite caseosa é uma doença infectocontagiosa caracterizada pela formação de abscessos nos linfonodos e nas vísceras, sendo causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. Esta doença acomete, principalmente, caprinos e ovinos e, a alta virulência da bactéria deve-se principalmente à ação da exotoxina fosfolipase D (pld). Devido ao crescimento da caprinovinocultura no Brasil e da grande incidência da linfadenite nos rebanhos deste setor, o objetivo neste estudo foi avaliar o potencial de uso da PLDr, como marcador de infecção por C. pseudotuberculosis por meio de testes sorológicos. Foram feitas reações de PCR em um volume final de 50 ?L, contendo: 5 ?L de tampão, 1,5 ?L de MgCl, 2 ?L de primer gateway foward, 2 ?L de primer reverse; 1 ?L de dNTP; 37 ?L de água milliQ; 0,5 U/ ?L de Taq DNA polimerase; 1 ?L de DNA genômico de C. pseudotuberculosis. A clonagem foi feita utilizando o sistema de expressão gateway, por meio de reações de recombinação. As reações foram transformadas em células de Escherichia coli BL21 e DH5?. A expressão foi obtida por indução das células transformadas em meio LB, com o antibiótico ampicilina, e IPTG 1 mM. A produção da proteína foi verificada pela análise em eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, corado por coomassie blue. Por meio da análise em gel de agarose foi possível comprovar a amplificação pela PCR do gene pld com aproximadamente 924 pb e, a partir da eletroforese em gel de poliacrilamida 13%, confirmou-se a produção ... Mostrar Tudo |
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Thesagro: |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Registro original: |
Embrapa Gado de Corte (CNPGC) |
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| Registros recuperados : 11 | |
| 5. |  | MELO, P. R. de; ROSINHA, G. M. S.; SANCHES, S. C.; GOMES, J. S; GALVÃO, C. E.; SOARES, C. O. Caracterização de amostras de Corynebacterium pseudotuberculosis isoladas de ovinos e caprinos. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 8., 2012, Campo Grande, MS. [Anais da..]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2012. 2 p. (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 198).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 6. | | ROSINHA, G. M. S.; MELO, P. R. de; SANTOS, L. R. dos; CARVALHO, C. E. G.; ALVARENGA, L. C. O.; ANDRADE, G. B.; SOARES, C. O. Avaliação da virulência de isolados de Corynebacterium pseudotuberculosis em camundongos BALB/c Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2018. 24 p. (Embrapa Gado de Corte. Boletim de pesquisa e desenvolvimento, 42). Título em inglês: Evaluation of virulence of Corynebacterium pseudotuberculosis isolates in BALB/c mice.| Tipo: Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 7. | | MELO, P. R.; ROSINHA, G. M. S.; FORNER, O.; ELISEI, C.; FRAGOSO, S.; SANTOS, L. R.; ARAUJO, F. R.; SOARES, C. O. Clonagem, purificação e avaliação da proteína PLDr de Corynebacterium pseudotuberculosis como marcador de infecção de ovinos e caprinos. In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza 1 p.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 8. | | SANCHES, S. C.; SOARES, C. O.; SANTOS, L. R. dos; VERBISCK, N. V.; GOMES, J. S.; MELO, P. R.; CARVALHO, C. E. G.; ROSINHA, G. M. S. Construção e avaliação humoral de uma vacina de DNA contra Corynebacterium pseudotuberculosis causadora da Linfadenite caseosa. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 8., 2012, Campo Grande, MS. [Anais da..]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2012. 2 p. (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 198).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 9. | | GOMES, J. S.; SOARES, C. O.; SANTOS, L. R. dos; SANCHES, S. C.; GALVÃO, C. E.; MELO, P. R; ROSINHA, G. M. S. Desenvolvimento de uma vacina de dna contra Corynebacterium pseudotuberculosis. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 8., 2012, Campo Grande, MS. [Anais da..]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2012. 2 p. (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 198).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 10. | | CARVALHO, C. E. G.; CARVALHO, C. E. G.; ROSINHA, G. M. S.; SOARES, C. O.; SANCHES, C. C.; FORNER, O.; SANCHES, S. C.; MELO, P. R.; GOMES, J. S. Desenvolvimento de Corynebacterium pseudotuberculosis mutante como amostra vacinal contra Linfadenite Caseosa. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 8., 2012, Campo Grande, MS. [Anais da..]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2012. 2 p. (Embrapa Gado de Corte. Documentos, 198).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Gado de Corte. |
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| 11. | | CARVALHO, C. E. G.; CARVALHO, C. E. G.; ROSINHA, G. M. S.; SOARES, C. O.; SANTOS, L. R. dos; ARAUJO, F. R.; ELISEI, C.; SANCHES, C. C.; FORNER, O.; SANCHES, S. C.; MELO, P. R. Desenvolvimento e avaliação de nova formulação vacinal contra Linfadenite Caseosa. In: JORNADA CIENTÍFICA EMBRAPA GADO DE CORTE, 7., 2011, CAMPO GRANDE, MS. [Anais da]... Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2011.| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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